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做細胞培養實驗你應該做到以下幾點

發布時間:2022-08-26 點擊量:132
  做細胞培養實驗你應該做到以下幾點
  做細胞培養實驗的實驗室越來越多,如果打算開展或者已經開展的單位或者實驗室一定要做到以下幾點。
  1、選擇正確的培養基
  在養細胞之前,就要了解,你所養細胞的來源以及種類和名稱,查閱一定量的文獻,確定所需培養液種類以及是否需要添加特殊成分,常用的細胞培養液有DMEM、RPMI1640、F12等等,一些常見的細胞基本可以使用這幾種培養基中的一種來培養,有的需要加入一定其他成分,這需要根據不同的細胞類型,查ATCC細胞庫或者查文獻,才能找到所需最佳培養液。選擇正確的培養液是養好細胞的第一步。
  2、了解細胞的生長習性
  不同的細胞生長習性不同。如成纖維細胞是貼壁生長,有一定的密度依賴性,密度小可能會出現不增殖,狀態差的情況,接種密度大時則需要隔天傳代,頻繁傳代則影響細胞狀態;再如RPMI-8226人多發性骨髓瘤細胞,是懸浮生長的,傳代需離心棄去上清即可??傊?,了解細胞生長習性,再加上正確的計數,才能掌握好傳代的密度。
  3、選擇優質的血清
  血清中含有細胞生長所必須的生長因子,作為哺乳動物細胞培養的附加物,血清的添加是十分重要的,因此,選擇優質的血清,是細胞養殖成功與否的關鍵!
  4、及時傳代和更換培養液
  在細胞增殖到一定的密度后,要及時傳代,根據細胞的生長速度和密度,及時更換培養液。更換過勤,浪費培養液,更換不夠及時,則細胞狀態轉差,一般需隔天更換培養液,具體可根據所養細胞種類予以調整。
  5、絕對的無菌意識
  前面林林總總全部都注意好了,如果無菌意識差,細胞中混入了微生物,則千里之堤潰于蟻穴,細菌的生長速度和破壞力,將迅速占領培養皿,破壞細胞結構,有些初學者會在培養液中加入1%的雙抗,但是,無菌意識不強,雙抗亦無法拯救你的細胞!
  6、傾心的呵護,頻繁的觀察
  做到以上幾點,就可以開始養你的細胞了,但是再次重申細胞嬌弱,在養細胞的過程中,難免會出現一些意想不到的問題,要想成功養好細胞,時時惦記它,頻繁地觀察,初期一天觀察2次都不足為過,出現任何預料外的情況,及時處理,才能保障收獲一盤“漂亮”的細胞。

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